Indhold
- etaper
- Metode 1 Observer bakterierne direkte
- Metode 2 Måling af biomasse
- Metode 3 Fortsæt med turbidimetri
Der er flere måder at måle bakterievækst på, og nogle er vanskeligere end andre at implementere. De enkleste bruges ofte og giver relativt nøjagtige resultater, forudsat at de er strenge under målinger. De mest almindelige teknikker er observation og tælling af bakterier, måling af biomasse og tør biomasse og turbidimetri. Dit skolelaboratorium skal have det nødvendige udstyr til mindst en af disse metoder.
etaper
Metode 1 Observer bakterierne direkte
-
Klargør udstyret. Ud over hvad der normalt findes i alle biologilaboratorier, har du brug for nogle specifikke genstande. Sørg for, at du har alle instrumenter og containere ved hånden, så du ikke behøver at gå frem og tilbage i skabet, hvor udstyret er opbevaret. Tænk over, hvad du vil gøre for at vide, hvad du vil bruge på hvert trin. Du bliver også nødt til at kende nogle nøgleord.- Få et hæmacytometer. Det er et blad med talkamre, der er forbundet med et mikroskop. Det er et meget let instrument at justere og bruge. Du kan finde nogle fra leverandører, der specialiserer sig i udstyr til skoler og forskningslaboratorier. En brugermanual leveres normalt.
- Tag en petriskål. Dette er en lille, rund, lav container, hvor du kan observere bakterier.
- Udtrykket "kultur" henviser til en mikroorganisme, der kunstigt forplantes som en del af et videnskabeligt eksperiment.
- "Kulturens bouillon" er det medium, hvor kulturen vil udvikle sig.
-
Brug petriskålen. Læg bakterierne i kassen og observer den under et mikroskop. Du kan også placere det direkte på et dias. Tæl derefter antallet af tilstedeværende bakterieceller. -
Sørg for, at du har den rigtige koncentration. Hvis der er for meget bakterier, overlapper de hinanden, og du vil ikke være i stand til at tælle dem korrekt. Hvis dette er tilfældet, fortynd kulturen ved at blande den med lidt bouillon. Hvis der er for få, vil resultatet ikke være signifikant. Du skal derefter filtrere bouillon for at øge koncentrationen. -
Tæl bakterierne. Det sidste trin er simpelthen at tælle. Se på tællekamrene under mikroskopet, og noter antallet af celler, du ser. Sammenlign resultatet med andre lignende oplevelser.
Metode 2 Måling af biomasse
-
Kontroller, at du har de nødvendige instrumenter. Denne metode er langsom at implementere og involverer brugen af dyre udstyr. Hvis du ikke vasker det, skal du bruge en anden teknik. På den anden side, hvis det laboratorium, du er i, har de rigtige værktøjer, er måling af biomasse og tørmasse ideel, fordi det giver nøjagtige resultater. Du har brug for:- en hydraulisk ovn med tvungen konvektion
- en aluminiums vejepande,
- flere Erlenmeyer-kolber,
- en centrifuge eller et laboratoriefiltreringssystem.
-
Kontroller, at afgrøden er i en Erlenmeyer-kolbe. Hvis dette ikke er tilfældet, hæld det ind. På dette stadie af eksperimentet befinder bakterierne sig stadig i kulturbuljong. De bliver adskilt senere. -
Tør vejepanden. Anbring det i ovnen for dette. Du kan også bruge et 47 mm diameter celluloseacetatmembranfilter med 0,45 μm porer. Uanset hvilket værktøj der bruges, måles dens masse nøjagtigt, så det kan trækkes fra de resultater, du får, når afgrøden placeres på den. -
Mix. Omryst lerlenmeyer, så kulturen er homogen. På grund af tyngdekraften har cellerne naturligvis en tendens til at falde til bunden af beholderen. Så du er nødt til at ryste lidt, for hvilken der er fordelt på en ensartet måde, og at din prøve er mere repræsentativ. -
Centrifuge. Ved hjælp af centrifugen skal man adskille bakterierne fra kulturbuljongen. Denne enhed bruges til at dreje containeren og en modvægt i meget høj hastighed. Bouillon flyder, hvilket kun holder levende stof. For mere information, finder du information om, hvordan du bruger en centrifuge på internettet. -
Hent dejen. Slip det på vejepanden. Du kan smide kulturbuljong, du har ikke brug for den mere, men hold lerlenmeyer ved hånden. -
Skyl centrifugen. Hæld skyllevandet på vejepanden ud over bakteriecellerne. Det opnåede resultat for alt giver dig biomasse. -
Find den tørre masse. For at kende den prøves tørre biomasse skal du placere vejepanden i ovnen indstillet til 100 ° C i en periode på 6 til 24 timer i henhold til instruktionerne, der fulgte med din enhed. Pas på ikke at overskride denne temperatur for at undgå forbrænding af bakterier. Vej derefter alt, og træk derefter massen af bakken.
Metode 3 Fortsæt med turbidimetri
-
Forbered dit udstyr. Du har brug for en lyskilde og et spektrofotometer, en enhed, der findes i de fleste videnskabelige laboratorier. Se den medfølgende brugermanual, da hver model har sin egen betjening. Denne metode er en af de hyppigst anvendte til måling af bakterievækst, da den kun kræver billige og brugervenlige værktøjer. -
Bringe lys ind i kulturen. Turbiditet bruges til at vurdere indholdet af en væske i partikler, det udgør for at bestemme, om det er mere eller mindre uklar. Det resultat, du får fra denne måling, vil blive givet i NTU (eller Nephelometric Turbidity Units). Det kan være nødvendigt at udføre en kalibrering af enheden for nøjagtigt at måle prøveens turbiditet. -
Tag notater. Turbiditet er mængden af bakterier i prøven. Spektrofotometret giver dig også mulighed for at kende transmissionens transmission (% T), hvis værdi er omvendt proportional med værdien af uklarhed. Sammenlign derefter de opnåede resultater på forskellige prøver for at måle bakterievækst.